Toxoplasmosis in Human and Animals Around the World. Diagnosis and Perspectives in the One Health Approach.

Toxoplasmosis is a unique health disease that significantly affects the health of humans, domestic animals, wildlife and is present in ecosystems, including water, soil and food. Toxoplasma gondii is one of the best-adapted parasites in the word. This parasite is able to persist for long periods in its hosts, in different geographic regions of the word. This review summarizes the current literature of these themes, focusing on: (1) toxoplasmosis, a zoonotic infection; (2) One health approach and toxoplasmosis; (3) human toxoplasmosis; (4) animal toxoplasmosis; (5) toxoplasmosis diagnosis, as immunological, parasitological and molecular diagnosis; (6) T. gondii outbreaks caused by infected meat, milk and dairy products, as well as, vegetables and water consume; (7) studies in experimental models; (8) genetic characterization of T. gondii strains; (9) extracellular vesicles and miRNA; and (10) future perspectives on T. gondii and toxoplasmosis. The vast prevalence of toxoplasmosis in both humans and animals and the dispersion and resistence of T. gondii parasites in environment highlight the importance of the one health approach in diagnostic and control of the disease. Here the different aspects of the one health approach are presented and discussed.

Ocorrência de perigos físicos em alimentos / Occurrence of physical hazards in food

A ocorrência de matérias estranhas com potencial perigo físico em alimentos é um grande desafio para a indústria alimentícia, e a análise microscópica é provavelmente o instrumento mais útil para detectá-las e identificá-las. Considerando a escassez de dados sobre os perigos físicos em produtos alimentícios no Brasil, o objetivo deste estudo foi descrever essa ocorrência nos produtos analisados no Núcleo de Morfologia e Microscopia do Centro de Alimentos do Laboratório Central do Instituto Adolfo Lutz (IAL), em São Paulo, no período de 2008 a 2020. Os resultados revelaram que, das 7.221 amostras de alimentos analisadas, 89 (1,2%) estavam em desacordo com a legislação em vigor, por conterem perigos físicos. De acordo com a categoria de alimentos, a ocorrência foi maior para bebidas (43%), seguida de cereais, farinha e farelo (22%). Quanto ao tipo de matéria estranha, os plásticos (duros e flexíveis) foram os mais frequentes (48%), seguidos dos metais (15%) entre as partículas perigosas detectadas nas amostras. A detecção e identificação de perigos físicos, por meio de análises microscópicas, contribuem para a segurança e qualidade dos produtos alimentícios oferecidos à população (AU).

The occurrence of physical hazards in food is a great challenge for the food industry, and microscopic analysis is probably the most useful instrument to detect and identify them. Considering the scarcity of data on physical hazards in food products in Brazil, the aim of this study was to describe this occurrence in the products analyzed at the Nucleus of Morphology and Microscopy of the Food Center of the Adolf Lutz Institute's Central Laboratory (IAL) in São Paulo, from 2008 to 2020. Results revealed that of the 7,221 analyzed food samples, 89 (1.2%) did not comply with the legislation due to the presence of physical hazards. According to the food category, the occurrence was higher in beverages (43%), followed by cereals, yeasts, flour and bran (22%). Regarding the type of foreign matter, among the dangerous particles detected, the most frequently found were plastics (48%) (hard and flexible), followed by metals (15%). The detection and identification of physical hazards by microscopic analysis contributes to the safety and quality of food products offered to the public. (AU)

Use of laboratory methodologies to confirm an outbreak of acute diarrheal disease caused by multiple pathogens / Uso de metodologias laboratoriais para confirmação de surto de doença diarreica aguda causada por múltiplos patógenos

The aim of this study was to investigate an outbreak caused by protozoa, which occurred in a municipality in the Brazil southern region. The investigations were carried out analyzing 47 fresh stool samples and 26 water samples by parasitological and molecular methods, as well as, direct immunofluorescence. After the filtrations of water samples and purification of stool samples, the concentrates were evaluated microscopically for presence of parasites. Molecular analyses were performed by polymerase chain reaction (PCR) for DNA detection of Giardia spp., Cryptosporidium parvum, C. hominis and Cyclospora cayetanensis. Out of 26 water samples, 30.8% (8/26) had waterborne protozoa and C. cayetanensis was the most prevalent (15.5%). Out of the 47 stool samples, 23.4% (11/47) were infected with C. cayetanensis and Giardia spp. The results showed that backwash water samples from filters of the Water Treatment Station were contaminated with C. cayetanensis, C. hominis and Giardia spp., suggesting the contamination of water sources with human waste brought by sewage. These results show the importance of protozoa investigation in water and stool samples by laboratory methodologies principally in outbreaks causing acute diarrheal disease (AU).

O objetivo do presente estudo foi investigar um surto causado por protozoários, ocorrido em um município da região sul do Brasil. As investigações foram realizadas analisando 47 amostras de fezes frescas e 26 amostras de água por métodos parasitológicos, moleculares e de imunofluorscência direta. Após as filtrações das amostras de água e purificação das amostras de fezes, os concentrados foram avaliados microscopicamente a procura de parasitas. A seguir, foram analisadas, pela reação em cadeia da polimerase (PCR), a detecção de DNA de Giardia spp., Cryptosporidium parvum, C. hominis e Cyclospora cayetanensis. Das 26 amostras de água, 30,8% (8/26) apresentaram protozoários de veiculação hídrica, sendo que, C. cayetanensis foi o mais prevalente (15,5%). Das 47 amostras de fezes, 23,4% (11/47) estavam infectadas por C. cayetanensis e Giardia spp. Os resultados mostraram que as águas de retrolavagem dos filtros da Estação de Tratamento de Água estavam contaminadas com C. cayetanensis, C. hominis e Giardia spp. sugerindo a contaminação dos mananciais com dejetos humanos trazidos pelo esgoto. Estes resultados mostram a importância da investigação de protozoários em água e fezes por metodologias laboratoriais, principalmente em surtos que causam doença diarreica aguda (AU).

Isolamento e identificação microscópica de elementos histológicos vegetais: contribuições para o controle de qualidade e segurança dos alimentos / Isolation and microscopic identification of vegetable histological elements: contributions to quality control and food safety

A microscopia alimentar atua no controle da qualidade e identidade dos alimentos utilizando recursos microscópicos para a identificação de elementos histológicos vegetais e de matérias estranhas. O objetivo do estudo foi apresentar as principais contribuições da análise microscópica de isolamento e identificação de elementos histológicos vegetais na vigilância dos alimentos analisados no Instituto Adolfo Lutz Central (IAL), de 2016 a 2020. Os dados das análises realizadas no período do estudo foram tabulados para categorização e avaliação dos resultados. Foram analisadas 4.189 amostras de alimentos e água, sendo 1.096 para pesquisa e identificação de elementos histológicos vegetais, com maior demanda para as análises de controle. As categorias de alimentos mais analisadas foram as misturas para o preparo de alimentos e alimentos prontos para consumo; café, cevada, chá, erva-mate e produtos solúveis; e os suplementos alimentares. Dentre as amostras analisadas, 5% não estavam de acordo com a rotulagem, principalmente devido à adição de ingrediente, com destaque para os açúcares e produtos para adoçar; as especiarias, temperos, molhos; e os suplementos alimentares. Por meio da análise microscópica foram verificadas adulterações em diversas categorias de produtos, demonstrando a sua contribuição às ações de vigilância na prevenção de fraudes e na segurança dos alimentos. (AU)

Food microscopy acts to control the quality and identity of foods using microscopic resources to identify vegetable histological elements and foreign matter.The aim of the study was to present the main contributions from microscopic analysis on isolation and identification of vegetable histological elements in the surveillance of foods analyzed at the Instituto Adolfo Lutz Central (IAL) from 2016 to 2020. Data from the analysis performed during the studied period were tabulated for categorization and further evaluation. Altogether, 4.189 food and water samples were analyzed and 1.096 samples underwent research and identification of vegetable histological elements, with greater demand for the control analysis.The most analyzed food categories were mixtures for food preparation and ready-to-eat foods; coffee, barley, tea, yerba mate and soluble products; and food supplements. Among the analyzed samples, 5% were not in accordance with the labeling, mainly due to the addition of an ingredient, especially sugars and sweetening products; spices, seasonings, sauces; and food supplements. Through microscopic analysis, adulterations were found in several categories of products, demonstrating its relevance to surveillance actions in fraud prevention and food safety. (AU)

Determination of the viability of Toxoplasma gondii oocysts by PCR real-time after treatment with propidium monoazide.

This study aimed to investigate a methodology for discriminating viable and non-viable T. gondii oocysts in water. Analyses included two steps: (i) microscopic investigation with vital dyes; (ii) molecular investigation, using a real time PCR (qPCR), after parasite treatment (or not) with propidium monoazide (PMA). The method was called qPCR-PMA. Oocyst aliquots were incubated (15 min) at 25 ºC or 100 ºC and analyzed by microscopy, after trypan blue and neutral red staining. Microscopic investigation determined viable and non-viable oocysts. For the molecular investigation, both aliquots of oocysts were treated with PMA. Non-viable oocysts, after PMA treatment, exhibited an inhibition of DNA amplification by qPCR. Although analyses were carried out with oocysts treated experimentally, these results suggest that qPCR-PMA can be a useful strategy to distinguish viable and non-viable T. gondii oocysts in water safety testing, showing if water is safe to drink.

Parâmetros microscópicos de açúcar de coco comercializados na cidade de São Paulo, Brasil: identidade e qualidade / Microscopic parameters of coconut sugar marketed in the city of São Paulo, Brazil: identity and quality

O açúcar de coco vem se tornando popular no Brasil e no mundo devido às alegações nutricionais de ser um adoçante natural e mais saudável em relação a outros açúcares. Sua produção ocorre de forma artesanal a partir da extração da seiva do floema da inflorescência da palmeira. Este trabalho teve por objetivo analisar microscopicamente a identidade e a presença de matérias estranhas em amostras de açúcar de coco, bem como verificar sua conformidade em relação às legislações sanitárias brasileiras. Foram analisadas 13 amostras comerciais de açúcar de coco da cidade de São Paulo quanto aos ensaios de pesquisa e identificação de elementos histológicos e pesquisa de matérias estranhas. A identificação de elementos histológicos vegetais revelou a presença de amidos morfologicamente semelhantes ao padrão de Tr iti c um sp. (trigo), Manihot sp. (mandioca) e Oryza sativa (arroz), além de amidos alterados. Também foram encontrados elementos histológicos vegetais compatíveis com padrão de Saccharum officinarum (cana-de-açúcar) e de Cocos nucifera (coco). Todas as amostras analisadas continham matérias estranhas com predomínio de fragmentos de insetos em 100% delas. Os resultados do estudo indicam falhas nas Boas Práticas de produção do açúcar de coco e a necessidade da adequação deste produto em relação às normas vigentes. (AU)

Coconut sugar has become popular in Brazil and worldwide due to the nutritional claims of being a natural and healthier sweetener compared to other sugars. Its production takes places in an artisanal way from the extraction of phloem sap from the inflorescence of the palm. The aim of this work was to microscopically analyze the identity and the presence of foreign matter in samples of coconut sugar, as well as to verify its compliance with Brazilian health legislation. Thirteen commercial samples of coconut sugar from the city of São Paulo were analyzed for the research and identification of histological elements and foreign matter. The identification of vegetable histological elements revealed the presence of starches morphologically similar to the Tr iti c um sp. (wheat), Manihot sp. (cassava) and Oryza sativa (rice) pattern, besides altered starches. Vegetable histological elements compatible with the Saccharum officinarum (sugar cane) and Cocos nucifera (coconut) pattern were also found. All samples analyzed contained foreign matter with predominance of insect fragments in 100% of the samples. The results of the study indicate flaws in the Good Practices for the production of coconut sugar and the need to adapt this product to current standards. (AU)

Parâmetros microscópicos de açúcar de coco comercializados na cidade de São Paulo, Brasil: identidade e qualidade / Microscopic parameters of coconut sugar marketed in the city of São Paulo, Brazil: identity and quality

O açúcar de coco vem se tornando popular no Brasil e no mundo devido às alegações nutricionais de ser um adoçante natural e mais saudável em relação a outros açúcares. Sua produção ocorre de forma artesanal a partir da extração da seiva do floema da inflorescência da palmeira. Este trabalho teve por objetivo analisar microscopicamente a identidade e a presença de matérias estranhas em amostras de açúcar de coco, bem como verificar sua conformidade em relação às legislações sanitárias brasileiras. Foram analisadas 13 amostras comerciais de açúcar de coco da cidade de São Paulo quanto aos ensaios de pesquisa e identificação de elementos histológicos e pesquisa de matérias estranhas. A identificação de elementos histológicos vegetais revelou a presença de amidos morfologicamente semelhantes ao padrão de Triticum sp. (trigo), Manihot sp. (mandioca) e Oryza sativa (arroz), além de amidos alterados. Também foram encontrados elementos histológicos vegetais compatíveis com padrão de Saccharum officinarum (cana-de-açúcar) e de Cocos nucifera (coco). Todas as amostras analisadas continham matérias estranhas com predomínio de fragmentos de insetos em 100% delas. Os resultados do estudo indicam falhas nas Boas Práticas de produção do açúcar de coco e a necessidade da adequação deste produto em relação às normas vigentes.

Coconut sugar has become popular in Brazil and worldwide due to the nutritional claims of being a natural and healthier sweetener compared to other sugars. Its production takes places in an artisanal way from the extraction of phloem sap from the inflorescence of the palm. The aim of this work was to microscopically analyze the identity and the presence of foreign matter in samples of coconut sugar, as well as to verify its compliance with Brazilian health legislation. Thirteen commercial samples of coconut sugar from the city of São Paulo were analyzed for the research and identification of histological elements and foreign matter. The identification of vegetable histological elements revealed the presence of starches morphologically similar to the Triticum sp. (wheat), Manihot sp. (cassava) and Oryza sativa (rice) pattern, besides altered starches. Vegetable histological elements compatible with the Saccharum officinarum (sugar cane) and Cocos nucifera (coconut) pattern were also found. All samples analyzed contained foreign matter with predominance of insect fragments in 100% of the samples. The results of the study indicate flaws in the Good Practices for the production of coconut sugar and the need to adapt this product to current standards.

Fragment detection of Coleopteran and Triatomine insects in experimentally contaminated acai pulp and sugarcane juice.

INTRODUCTION: Oral transmission of acute Chagas disease is an emerging public health concern. This study aimed to detect insect fragments in experimentally contaminated food, by comparing triatomines with other insects. METHODS: Food samples were experimentally contaminated with insects, processed to recover their fragments by light filth, and analyzed by microscopy and Polymerase Chain Reaction (PCR). RESULTS: Morphological differences between coleopteran and triatomine insects were observed in microscopic images. PCR was efficient in amplifying Triatominae DNA in the experimentally contaminated food. CONCLUSIONS: This methodology could be utilized by food analysts to identify possible insect contamination in food samples.

Avaliação das reações de Hemaglutinação Indireta (HI) e Aglutinação Modificada (MAT) na detecção de anticorpos IgG anti-T. gondii em exsudatos cárneos bovinos / Evaluation of indirect Hemagglutination (HI) and Modified Agglutination (MAT) reactions in the detection of anti-T. gondiiIgG antibodies in bovine meat exudates

Toxoplasmose é uma zoonose parasitária com ampla distribuição mundial provocada pelo Toxoplasma gondii, considerado um dos protozoários mais bem sucedidos do planeta, pois infecta cerca de um terço da população mundial. Dentre as formas de transmissão, o consumo de carne mal cozida, contendo cistos, tem sido considerado um fator de risco para aquisição desta zoonose. Uma abordagem alternativa para o controle da toxoplasmose pela ingestão de carne bovina seria a sorologia dos bovinos, já que animais soropositivos albergam cistos teciduais. Contudo, a obtenção de soro para esta avaliação, nem sempre é factível, dada a dificuldade de coleta de sangue durante a linha de abate e sua ausência em cortes comerciais. O exsudato cárneo é uma alternativa para detecção de anticorpos anti - T. gondii em cortes comerciais de carne, que foi a proposta deste estudo para avaliar o desempenho dos testes de Hemaglutinação Indireta (HI) e Aglutinação Modificada (MAT) quando comparados ao ELISA usando exsudato cárneo. Este estudo mostrou que a acurácia dos testes de aglutinação não foi viável devido aos baixos índices de sensibilidade e especificidade quando comparados ao ELISA. Estes dados demonstram a importância da escolha de testes eficientes como ELISA para aplicação no controle da qualidade e inocuidade de cortes comerciais de carne bovina. (AU)

Toxoplasmosis is a parasitic zoonosis with a wide worldwide distribution caused by Toxoplasmagondii, which is considered one of the most successful protozoa on the planet, since it can infect a third of the world population. Among the forms of transmission, consumption of undercooked meat has been considered as a risk factor for the acquisition of this zoonosis. An alternative approach to toxoplasmosis control by beef ingestion could be the serological diagnosis in cattle, since seropositives animals harbor tissue cysts. However, the use of serum for this evaluation is not always feasible due to the difficulty of blood collection during slaughter and its absence in commercial beef cuts. Meat exudate is an alternative for the detection of anti-T. gondii antibodies in commercial beef cuts, which was the propose of this study to evaluate the performance of Indirect Hemagglutination (HI) and Agglutination Modified (MAT) tests compared to ELISA using meat exudates. This study showed that the agglutination tests accuracy was not viable due to low sensitivity and specificity indexes when compared to ELISA. These data demonstrate the importance of choosing accurate tests such as ELISA for application in quality control and safety of commercial beef cuts. (AU)

Avaliação das reações de Hemaglutinação Indireta (HI) e Aglutinação Modificada (MAT) na detecção de anticorpos IgG anti-T. gondii em exsudatos cárneos bovinos / Evaluation of indirect Hemagglutination (HI) and Modified Agglutination (MAT) reactions in the detection of anti-T. gondii IgG antibodies in bovine meat exudates

Toxoplasmose é uma zoonose parasitária com ampla distribuição mundial provocada pelo Toxoplasma gondii, considerado um dos protozoários mais bem sucedidos do planeta, pois infecta cerca de um terço da população mundial. Dentre as formas de transmissão, o consumo de carne mal cozida, contendo cistos, tem sido considerado um fator de risco para aquisição desta zoonose. Uma abordagem alternativa para o controle da toxoplasmose pela ingestão de carne bovina seria a sorologia dos bovinos, já que animais soropositivos albergam cistos teciduais. Contudo, a obtenção de soro para esta avaliação, nem sempre é factível, dada a dificuldade de coleta de sangue durante a linha de abate e sua ausência em cortes comerciais. O exsudato cárneo é uma alternativa para detecção de anticorpos anti - T. gondii em cortes comerciais de carne, que foi a proposta deste estudo para avaliar o desempenho dos testes de Hemaglutinação Indireta (HI) e Aglutinação Modificada (MAT) quando comparados ao ELISA usando exsudato cárneo. Este estudo mostrou que a acurácia dos testes de aglutinação não foi viável devido aos baixos índices de sensibilidade e especificidade quando comparados ao ELISA. Estes dados demonstram a importância da escolha de testes eficientes como ELISA para aplicação no controle da qualidade e inocuidade de cortes comerciais de carne bovina.

Toxoplasmosis is a parasitic zoonosis with a wide worldwide distribution caused by Toxoplasma gondii, which is considered one of the most successful protozoa on the planet, since it can infect a third of the world population. Among the forms of transmission, consumption of undercooked meat has been considered as a risk factor for the acquisition of this zoonosis. An alternative approach to toxoplasmosis control by beef ingestion could be the serological diagnosis in cattle, since seropositives animals harbor tissue cysts. However, the use of serum for this evaluation is not always feasible due to the difficulty of blood collection during slaughter and its absence in commercial beef cuts. Meat exudate is an alternative for the detection of anti-T. gondii antibodies in commercial beef cuts, which was the propose of this study to evaluate the performance of Indirect Hemagglutination (HI) and Agglutination Modified (MAT) tests compared to ELISA using meat exudates. This study showed that the agglutination tests accuracy was not viable due to low sensitivity and specificity indexes when compared to ELISA. These data demonstrate the importance of choosing accurate tests such as ELISA for application in quality control and safety of commercial beef cuts.

Fragment detection of coleopteran and triatomine insects in experimentally contaminated acai pulp and sugarcane juice

INTRODUCTION: Oral transmission of acute Chagas disease is an emerging public health concern. This study aimed to detect insect fragments in experimentally contaminated food, by comparing triatomines with other insects. METHODS: Food samples were experimentally contaminated with insects, processed to recover their fragments by light filth, and analyzed by microscopy and Polymerase Chain Reaction (PCR). RESULTS: Morphological differences between coleopteran and triatomine insects were observed in microscopic images. PCR was efficient in amplifying Triatominae DNA in the experimentally contaminated food. CONCLUSIONS: This methodology could be utilized by food analysts to identify possible insect contamination in food samples. (AU)

Determinação da viabilidade de Trypanosoma cruzi em polpa de açaí e caldo de cana de açúcar experimentalmente contaminados / Determination of the viability of Trypanosoma cruzi in the experimentally contaminated açaí pulp and sugar cane juice

Segundo a Organização Pan-Americana da Saúde, órgão da Organização Mundial da Saúde,1 a doença de Chagas está entre as dezessete doenças tropicais negligenciadas, atingindo cerca de 6 a 7 milhões de pessoas no mundo. Nos 21 países endêmicos da América Latina há cerca de 5 milhões e, no Brasil, 2 milhões de indivíduos infectados. Anualmente, ocorrem 50.000 novos casos e 12.000 mortes. Os países Argentina, Brasil e México concentram mais de 60% dos casos, seguidos pela Bolívia e Colômbia.1 Historicamente, a transmissão e morbidade estavam concentradas em áreas rurais da América Latina, onde as condições precárias de moradia favoreciam a infestação pelos vetores. No entanto, nas últimas décadas, o sucesso dos programas de controle vetorial contribuiu substancialmente para a diminuição da transmissão em áreas rurais(AU)

Microscopic and molecular identification of foreign matter in food: detection of fraudulent practices Identification of foreign matter: food fraud / Identificação microscópica e molecular de matérias estranhas em alimentos: detecção de práticas fraudulentas

Introduction: The most frequent demands on microscopic food analysis are allegations of consumers finding macroscopic foreign matter or suspecting the presence of undeclared ingredients on products labels. The byproducts and foreign matters detection are fundamental practice for indirectly verifying the conditions of food production. Objective: This study reports the processes of microscopic and molecular identification (PCR) of a foreign matter found in a meat pie after a consumer complaint, occurred in the city of Itapira, state of São Paulo, Brazil. Method: Two distinct procedures were used to identify foreign matter: macroscopic examination, following FDA standards, and polymerase chain reaction (PCR) technique to identify DNA extracted from foreign materials. Results: The macroscopic analysis identified animal taste buds composing the pie fillings, and the PCR test confirmed that they were of bovine origin. Conclusions: Macroscopic analysis and the PCR test allowed the identification of the type of foreign matters and confirmed its bovine origin, what was enough to characterize it as a fraud by the improper use of inferior tissues in the preparation of ready-to-eat pastry.

Introdução: Uma das mais frequentes demandas de análise microscópica de alimentos são denúncias de consumidores que encontram matéria estranha macroscópica ou suspeitam da presença de ingredientes não declarados no rótulo do produto. A detecção de subprodutos e matérias estranhas é uma prática fundamental para verificar indiretamente a condição de produção de alimentos. Objetivo: Este estudo relata o processo de identificação microscópica e molecular (PCR) de uma matéria estranha encontrada em um pastel de carne após queixa de um consumidor no município de Itapira, estado de SP, Brasil. Método: Dois procedimentos distintos foram empregados para a identificação da matéria estranha: exame macroscópico seguindo padrões estabelecidos pelo FDA e técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) para identificação do DNA extraído da matéria estranha. Resultados: A análise macroscópica identificou a matéria estranha como sendo papilas gustativas de origem animal, e o teste da PCR confirmou que as mesmas eram de origem bovina. Conclusões: A análise macroscópica e o teste da PCR permitiram a identificação do tipo de matéria estranha e confirmação de sua origem bovina, caracterizando a fraude pelo uso indevido de tecidos inferiores na preparação de pastéis prontos para consumo.

Molecular detection of Trypanosoma cruzi in acai pulp and sugarcane juice.

Chagas disease, caused by Trypanosoma cruzi affects about 6-8 million people worldwide. Although transmission by triatomine insects has been controlled, other means of transmission maintain the infection. These forms of transmission are responsible for introducing Chagas disease in other non-endemic countries of the world. Thus, Chagas disease, nowadays is a worldwide health problem. In Brazil, acai pulp and sugarcane juice have been associated with Chagas disease outbreaks. The difficulties in isolation of the parasite from foods are hampering source tracking which could allow the confirmation of an implicated food commodity in these outbreak investigations. To address this scientific gap, we evaluated the performance of real-time PCR (qPCR) for detecting T. cruzi in acai pulp and sugarcane juice. All experiments were performed with acai pulp and sugarcane juice samples contaminated with different concentrations of T. cruzi. In assays with qPCR, the results showed that the ideal procedure for T. cruzi identification in acai pulp and sugarcane juice consisted of: i. centrifugation; ii. DNA extraction with a commercial kit for stool matrix; and iii. qPCR using a specific molecular marker for T. cruzi. The seeding in LIT medium of experimentally contaminated foods was effective in detecting the parasitic load by qPCR. The efficacy of qPCR was also verified testing food samples crushed with infected Triatomines. In conclusion, this methodology can be used to perform rapid diagnosis in outbreaks, facilitating measures in disease control.

Indicadores microscópicos de qualidade de molhos tipo ketchup / Microscopic quality indicators of ketchup sauces

O tomate (Solanum lycopersicum) é um produto agrícola importante no mundo inteiro e também o vegetal mais consumido no Brasil. O ketchup especificamente, é um produto a base de tomate, utilizado comumente para acompanhar pratos prontos, sanduíches e saladas. Foram analisadas 30 amostras de 13 marcas diferentes, com lotes e validades aleatórios, no período de julho a outubro de 2013, adquiridas no comércio do grande ABC, para pesquisa de sujidades leves. Os resultados revelaram que 6 amostras (20%) continham pelo de roedor e 26 (86,6%) apresentaram fragmentos de insetos. Os resultados foram também analisados e discutidos de acordo com as legislações RDC n° 175/2003, Portaria n° 326/1997 e RDC n°14/2014. Conclui- se que as condições higienicossanitárias do ketchup se encontram comprometidas tendo em vista a alta porcentagem de amostras com a presença de matérias estranhas. Faz- -se necessário um monitoramento constante desse tipo de alimento a fim de oferecer à população um produto seguro e de boa qualidade.

Análise microscópica do amido extraído de milho (Zea mays) convencional e transgênico / Microscopic analysis of the starch extracted from conventional and transgenic corn (Zea mays)

Os programas de melhoramento genético têm desenvolvido uma grande variedade de sementes de milho, com características que conferem maior resistência às adversidades do plantio, e permitem a extensão do seu cultivo nas mais diversas condições climáticas. A análise microscópica de grãos é uma ferramenta de grande relevância na caracterização das matérias primas e modificações do amido. Levando-se em conta o fato do uso de transgênicos em alimentos ser ainda controverso, e principalmente para os consumidores, o considerável aumento de sua utilização como ingrediente em produtos alimentícios, o presente trabalho investigou a possibilidade de detectar, por meio de microscopia, a variação das características dos grãos de amido de milho transgênico em comparação com os grãos de amido de milho convencional. Os resultados indicaram diferenças entre os grãos de amido extraídos de milho convencional e naqueles extraídos de milho transgênico. O amido extraído de milho convencional, em sua maioria, caracterizou-se pela presença de grânulos de formato poliédrico, alguns ligeiramente abaulados, com hilo em formato estrelado. No amido extraído dos grãos de milho transgênico, o hilo apresentou formato linear, pontual ou ausente. Estas propriedades serão úteis para caracterizá-los nos trabalhos de pesquisa e de identificação em produtos alimentícios.

The genetic programs have developed the varieties of maize seed, with features that providegreater resistance to the planting adversity, thus to carry out the extension of their cultivationat varied weather conditions. Microscopic analysis of grain is a relevant tool for characterizingthe raw materials and the starch modifications. Taking into account the fact of the use ofgenetically modified organisms (GMOs) in food being still controversial, especially for consumers, and also owing to their significant increased use as ingredients in food products, the presentstudy investigated the possibility in detecting the characteristics variations of transgenic cornstarch grains by microscopy, in comparison with the conventional corn starch grains. The results showed significant differences between the conventional starch grains-extracted maize andthose derived from transgenic maize. Conventional corn-extracted starch was characterized mostly by the presence of polyhedral shaped beads, some of them slightly cambered, with Starryformat hilum, while the extracted starch from genetically modified maize grain, the hilum showed a linear format, punctual or absent. These findings will be valuable for conducting studies and for performing food products characterization and identification.

Molecular detection of Trypanosoma cruzi in acai pulp and sugarcane juice

Chagas disease, caused by Trypanosoma cruzi affects about 6-8 million people worldwide. Although transmission by triatomine insects has been controlled, other means of transmission maintain the infection. These forms of transmission are responsible for introducing Chagas disease in other non-endemic countries of the world. Thus, Chagas disease, nowadays is a worldwide health problem. In Brazil, acai pulp and sugarcane juice have been associated with Chagas disease outbreaks. The difficulties in isolation of the parasite from foods are hampering source tracking which could allow the confirmation of an implicated food commodity in these outbreak investigations. To address this scientific gap, we evaluated the performance of real-time PCR (qPCR) for detecting T. cruzi in acai pulp and sugarcane juice. All experiments were performed with acai pulp and sugarcane juice samples contaminated with different concentrations of T. cruzi. In assays with qPCR, the results showed that the ideal procedure for T. cruzi identification in acai pulp and sugarcane juice consisted of: i. centrifugation; ii. DNA extraction with a commercial kit for stool matrix; and iii. qPCR using a specific molecular marker for T. cruzi. The seeding in LIT medium of experimentally contaminated foods was effective in detecting the parasitic load by qPCR. The efficacy of qPCR was also verified testing food samples crushed with infected Triatomines. In conclusion, this methodology can be used to perform rapid diagnosis in outbreaks, facilitating measures in disease control.

Estudo da identidade histológica de subprodutos de soja (Glycine max L. ) / Study on the histological identity of soy products (Glycine max L. )

A partir do grão de soja são obtidos diversos subprodutos, tais como farinha, farelo, proteína texturizada e óleo, constantemente utilizados em formulações de alimentos como biscoitos, pães, chocolates, entre outros. Durante o processamento, a estrutura da soja pode ser alterada, de forma a impossibilitar a identificação histológica deste vegetal nos produtos alimentícios. Este trabalho teve como objetivo identificar as características histológicas de diferentes subprodutos de soja. Amostras de proteína texturizada de soja, proteína de soja desengordurada, proteína isolada de soja e proteína de soja concentrada foram cedidas por uma indústria processadora de soja. Estas amostras foram submetidas à análise histológica, seguindo-se os Métodos Oficiais do Instituto Adolfo Lutz, para verificação da presença dos elementos histológicos característicos. Dentre os quatro subprodutos analisados, somente a proteína isolada de soja não apresentou elementos histológicos característicos. A proteína de soja concentrada apresentou menor quantidade de elementos histológicos em relação à proteína texturizada de soja e à proteína de soja desengordurada. Estes achados contribuirão para a análise de produtos à base de soja no que se refere à sua composição, a fim de identificar possíveis fraudes ou contaminações.

From the soya beans are obtained various by-products such as flour, meal, textured protein and oil, which are regularly used in food formulations such as cookies, breads, chocolates, among others. During the food processing, the soya structure might be changed, and turning into hard to perform the histological identification of this vegetable in the food products. This study aimed at identifying the histological characteristics of different soy sub-products. Textured soy protein, defatted soy protein, soy-isolated protein and concentrated soy protein samples were provided by a soybean processor industry. These samples were investigated by means of histological analysis, according to the Official Methods of the Instituto Adolfo Lutz for detecting the presence of the characteristic histological elements. Among the four analyzed sub-products, the isolated soy protein only showed no characteristic histological elements. The concentrated soy protein showed the lowest amounts of histological elements in relation to the textured soy protein and the defatted soy protein. These findings will contribute to the soya-based products analyses concerning their composition, in order to identify the potential fraud or contamination.

Monitoring the extraneous matters in pulps of tomato, guava, mango and strawberry marketed during the seasons of the year

Fruit-derived products sold in Brazil and for exportation are required to comply with the quality and safety standards. These products and, among them, the fruit pulps may contain extraneous materials due to the inappropriate conditions or practices during their production, storage and distribution, including filth, decomposed material and miscellaneous materials. This study aimed at evaluating the sanitary conditions(regarding to extraneous materials) of fruit pulps sold in the Great São Paulo, during the four seasons of 2010. This investigation analyzed 115 tomato pulp, 93 guava pulp, 99 strawberry pulp and 89 mango pulp by means of the techniques described in the AOAC, 18th, 2005, Chapter 16 - Extraneous Materials: Isolation. Insect fragments were the most frequent filth category detected in the pulps (in 93 % of guava and strawberry, 77 % of tomato and 48 % of mango samples), followed by the rodent hair (in 24 % of tomato, in 3 % of guava, in 1 % of strawberry and in 0.5 % of mango samples). The occurrence of miteswas mostly frequent in strawberry samples (33 %). This study indicated that the majority of the analyzed pulps showed satisfactory sanitary conditions, evidencing that the Good Manufacturing Practices was adopted by the productive sector...